期刊简介
《肝胆胰外科杂志》是肝胆胰外科的专业性学术期刊，创刊于1989年，2019年1月起正式变更为单月刊，每月25日出版，国内外公开发行。本刊的办刊宗旨是：贯彻党和国家的卫生工作方针、政策，坚持理论与实践、普及与提高相结合的原则，反映我国肝胆胰外科的新进展、新动向，促进学术交流。
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首页>肝胆胰外科杂志
- 杂志名称：肝胆胰外科杂志
- 主管单位：浙江省教育厅
- 主办单位：温州医学院
- 国际刊号：1007-1954
- 国内刊号：33-1196/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：本刊已被国家科技部列为“中国科技论文统计源期刊”（中国科技核心期刊）期刊收录：哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏
利用重构pc-MDR1质粒快速诱导肝癌细胞耐药
韩宇；陈孝平；蒋飞照；余正平；朱冠保；张启瑜
关键词：多药耐药基因, 基因克隆, 质粒构建, 转染
摘要：目的: 从裸鼠原位耐药肿瘤组织中进行MDR1 cDNA的全克隆和pc-MDR1重组质粒的构建,并转染Hep G2细胞,快速诱导其耐药,并筛选其抗性克隆. 方法: 设计单酶切位点引物,利用长距离逆转录PCR(Long RT-PCR)技术,由HepG2耐药细胞扩增 MDR1 cDNA,约3.8 kb大小.将其插入至真核表达载体pcDNA 3.0质粒中构建pc-MDR1诱导质粒,使其能够在真核细胞中表达p-gp蛋白.转染HepG2细胞,并用G418筛选出转染的细胞. 结果: 成功地扩增出3.8 kb左右的MDR1 cDNA片段,经酶切鉴定、RT-PCR扩增特异片段和序列测序结果显示质粒构建初步成功,用G418筛选细胞耐药抗性克隆的时间约为14 d. 结论: 从耐药肿瘤组织中进行MDR1 cDNA的全克隆和pc-MDR1诱导质粒的构建成功快速诱导了肝癌细胞发生耐药,为进一步研究肿瘤细胞的耐药机制奠定了很好的基础.
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