期刊简介
《肝胆胰外科杂志》是肝胆胰外科的专业性学术期刊,创刊于1989年,2019年1月起正式变更为单月刊,每月25日出版,国内外公开发行。本刊的办刊宗旨是:贯彻党和国家的卫生工作方针、政策,坚持理论与实践、普及与提高相结合的原则,反映我国肝胆胰外科的新进展、新动向,促进学术交流。
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首页>肝胆胰外科杂志

- 杂志名称:肝胆胰外科杂志
- 主管单位:浙江省教育厅
- 主办单位:温州医学院
- 国际刊号:1007-1954
- 国内刊号:33-1196/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:本刊已被国家科技部列为“中国科技论文统计源期刊”(中国科技核心期刊)期刊收录:哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏
大鼠GSK3β基因RNAi腺病毒载体的构建与鉴定及其对肝卵圆细胞增殖的促进作用
谢元康;钟骏桥;蒋磊;季晓克;郭旭;张启瑜;单云峰
关键词:GSK3β, RNAi, 腺病毒, 肝卵圆细胞, 大鼠
摘要:目的 构建并鉴定特异性大鼠糖原合成酶激酶3β(GSK3β)基因siRNA腺病毒载体,观察其对肝卵圆细胞系WBF344增殖的影响.方法 用DNA重组技术将针对GSK3β基因不同部位所设计的2对shRNA序列克隆到高效RNAi真核表达质粒载体pGenesil1.1中,构建shRNA表达载体pGenesil1.1GSK3β.分别酶切重组质粒及pDC312载体,转化连接,构建腺病毒载体pDC312GSK3β,PCR扩增与鉴定.脂质体法介导腺病毒载体与骨架质粒pPE3F11共转染293细胞,包装产生腺病毒颗粒AdDC312GSK3β并测定滴度.取病毒上清感染WBF344细胞,荧光显微镜观察细胞荧光含量,Western blotting检测GSK3β蛋白表达.CCK8测定转染前后WBF344增殖变化.结果 经PCR酶切及Western blotting技术证实成功构建了针对大鼠GSK3β基因RNAi质粒pGenesil1.1GSK3β及GSK3β基因RNAi重组腺病毒载体AdDC312GSK3β.Western blotting证实该重组腺病毒载体可抑制WBF344细胞GSK3β的表达.CCK8结果显示干扰GSK3β可促进WBF344细胞增殖.结论 成功构建了针对GSK3β基因RNAi的腺病毒载体,并在大鼠肝卵圆细胞系WBF344中稳定表达,促进细胞增殖.
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